背景：

       促甲状腺激素受体（Thyroid-stimulating hormone receptor, TSHR）主要存在甲状腺滤泡细胞膜上，在人体生理及病理情况下都发挥着重要作用。TSHR为促甲状腺激素（Thyroid-stimulating hormone, TSH）的特异性受体，是一种G蛋白偶联受体，TSH通过与细胞表面的TSHR结合，触发细胞内cAMP的产生，作为第二信使的cAMP通过识别其位于基因启动子区的特异性反应元件CRE（cAMP response elements）对下游基因进行调控。TSHR表达细胞株是TSH及TSHR相关研究的有效手段，该方法需对细胞中产生的cAMP进行定量，需要昂贵的试剂盒和繁琐的ELISA检测步骤^[1]。

图1. TSHR信号通路^[2]

       Rhinogen^® TSHR Reporter Bioassay是一种生物发光报告基因检测方法，其作用机理（图2）基于TSHR反应的主要信号通路cAMP/PKA信号途径。本系统采用工程改造的中国仓鼠卵巢细胞（Chinese hamster ovary cells，CHO cells）作为测活细胞，该细胞株稳定表达TSHR以及由CRE反应元件驱动表达的萤火虫荧光素酶。在该细胞中，TSHR的激活触发cAMP的产生，cAMP则激活荧光素酶基因的表达，而荧光素酶的活性通过生物发光进行定量。

图2.Rhinogen^® TSHR Reporter Bioassay原理图

产品规格：

       Rhinogen^® TSHR报告基因检测系统提供的TSHR相关生物学活性检测方法操作具有操作简便（图3）、变异性低、量效关系良好、灵敏度高等特点。

       1. 原理明确：基于TSHR反应的主要信号通路cAMP/PKA信号途径；

       2. 应用广泛：可用于TSH的微量测定、TSHR拮抗剂的高通量筛选、TSH和TSHR作用机理研究；

       3. 通 量 高：可在96孔、384孔培养板中进行测定；

       4. 快速易用：检测过程简单，检测试剂易用；

       5. 信噪比高：信号/背景的比率高。

       Rhinogen^® TSHR报告基因检测系统的各项特性使得其可作为针对TSH和TSHR相关研究、TSHR药物筛选及检测的有效手段。同时，该法可作为针对TSHR药物的生物学活性常规检测方法及批签发检测指标。

图3. Rhinogen^®TSHR Reporter Bioassay检测流程图

运输及存储：

       运输方式：干冰运输

       储       存：收到细胞后，请立即将TSHR报告基因测活细胞冻存管转移至-140°C以下的保存条件长期保存。

参考文献：

       [1] 王少艳, 冯凭, 方佩华. 人促甲状腺激素受体的表达及其抗体的检测. 国际内分泌代谢杂志　Intern J Endocrinol Metab, 2006, 26(3): 178-180

       [2] Tetsuo Kondo, Shereen Ezzat and Sylvia L. Asa. Pathogenetic mechanisms in thyroid follicular-cell neoplasia. NATURE REVIEWS CANCER. 2006, 6: 292-306。